ВОЗМОЖНОСТИ НЕИНВАЗИВНОЙ ДИАГНОСТИКИ ОТТОРЖЕНИЯ ТРАНСПЛАНТАТА ПЕЧЕНИ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ТЕРМИНАЛЬНО-ДИФФЕРЕНЦИРОВАННЫХ ЭФФЕКТОРНЫХ CD8+ Т-ЛИМФОЦИТОВ
Аннотация
Введение. Одна из главнейших проблем современной трансплантологии – иммунологическая дисфункция трансплантата, частота развития которой достигает 40%. Пункционная биопсия в 2,2% случаев сопряжена с развитием осложнений и может привести к летальному исходу. Цель исследования – разработка методики неинвазивной диагностики отторжения трансплантата печени в отдаленном периоде после операции с использованием терминально-дифференцированных эффекторных CD8+Т-лимфоцитов. Материал и методы. Проведено пилотное одноцентровое обсервационное ретроспективное случай-контроль исследование, включающее 45 реципиентов после ортотопической трансплантации печени. По клиническому течению послеоперационного периода пациенты стратифицировались на 2 группы в зависимости от наличия эпизодов отторжения в трансплантате. Все пациенты после трансплантации получали иммуносупрессивную терапию. Иммунофенотипы реципиентов определялись методом проточной цитофлоуметрии. Всем пациентам была выполнена пункционная биопсия трансплантата. Результаты. Результаты исследования биоптатов трансплантатов печени показали, что 14 пациентов (31%) из 45 имели морфологические признаки отторжения. У пациентов с отторжением был достоверно более высокий уровень абсолютного количества СD8+ Тemra-клеток, что составило 0,23 (0,14; 0,38) ×109/л по сравнению с пациентами без отторжения – 0,09 (0,034; 0,16)×109/л (р=0,034). Результаты ROC- анализа показали, что наиболее оптимальный порог отсечения уровня СD8+ Тemra-лимфоцитов при диагностике иммунологической дисфункции трансплантата печени в отдаленном периоде составил 0,1882×109/л, чувствительность и специфичность при данном пороге отсечения составила 73,33 (95% ДИ: 44,9-92,0) и 96,55 (95% ДИ: 82,2-99,4,) соответственно. Выводы. Увеличение абсолютной численности терминально-дифференцированных эффекторных CD8+ Т-лимфоцитов является диагностическим критерием у пациентов с иммунологической дисфункцией трансплантата в позднем посттрансплантационном периоде. Высокая чувствительность и специфичность порога отсечения абсолютного количества CD8+ Тemra-лимфоцитов у пациентов после трансплантации печени и достоверная разница между количеством клеток у пациентов с нормальным послеоперационным течением, имеющих иммунологическую дисфункцию трансплантата, позволяет рассматривать субпопуляцию Т-лимфоцитов как прогностический биомаркер отторжения в позднем посттрансплантационном периоде. Корреляция этого показателя с результатами морфологического исследования делает его альтернативным и, главное, безопасным неинвазивным способом ранней диагностики отторжения.Литература
Gonzalez MG, Madrazo CP, Rodriguez AB, Gutiérrez MG, Herrero JI, Pallardó JM, Ortiz de Urbina J, Paricio PP. An open, randomized, multicenter clinical trial of oral tacrolimus in liver allograft transplantation: a comparison of dual vs. triple drug therapy. Liver Transpl. 2005;11(5):515-524. https://doi.org/10.1002/lt.20382.
Piccinino F, Sagnelli E, Pasquale G, Giusti G, Battocchia A, Bernardi M, Bertolazzi R, Bianchi FB, Brunelli E, Budillon G, Buscarini L, Cargnel A, Carrara G, Carulli N, Caruso L, Cataldi V, Celle G, Chiandussi L, Chiesa L, Colombo M, Coltorti M, De Bac C, Del Vecchio Blanco C, Di Marco G, Fiaccadori F, et al. Complications following percutaneous liver biopsy: A multicentre retrospective study on 68,276 biopsies. J Hepatol. 1986;2(2):165-173. https://doi.org/10.1016/s0168-8278(86)80075-7.
Benichou G, Gonzalez B, Marino J, Ayasoufi K, Valujskikh A. Role of Memory T Cells in Allograft Rejection and Tolerance. Front Immunol. 2017;8:170. https://doi.org/10.3389/fimmu.2017.00170.
Tilly G, Yap M, Brouard S, Degauque N. TEMRA CD8 T-Cells Are Highly Cytopathic Cells That Escape From Costimulatory Based-Therapy. Transplantation. 2015;98:318-319. https://doi.org/10.1097/00007890-201407151-01012.
Yap M, Boeffard F, Clave E, Pallier A, Danger R, Giral M, Dantal J, Foucher Y, Guillot-Gueguen C, Toubert A, Soulillou JP, Brouard S, Degauque N. Expansion of Highly Differentiated Cytotoxic Terminally Differentiated Effector Memory CD8+ T Cells in a Subset of Clinically Stable Kidney Transplant Recipients. J Am Soc Nephrol. 2014;25(8):1856-1868. https://doi.org/10.1681/ASN.2013080848.
Irure J, Ballesteros M, Iturbe D, Merino D, Mora V, Mons R, Fernández-Rozas S, Asensio E, Gómez-Román J, Cifrián J, López-Hoyos M, Segundo DS. CD8 T Effector Memory T Cells as Predictive Biomarker of Severe Acute Rejection in Lung Transplantation. Transplantation. 2013;102:S682. https://doi.org/10.1097/01.tp.0000543627.01804.d6.
Yap M, Boeffard F, Pallier A, Danger R, Giral M, Dantal J, Foucher Y, Guillot-Gueguen C, Soulilou J, Brouard S, Degauque N. A Subset of Patients Accumulated Highly Differentiated CD4 and CD8 T Memory Cells Despite Having Long-Term Stable Graft Function. Transplantation. 2014;98:877. https://doi.org/10.1097/00007890-201407151-02992.
Sarwal MM, Jani A, Chang S, Huie P, Wang Z, Salvatierra OJr, Clayberger C, Sibley R, Krensky AM, Pavlakis M. Granulysin expression is a marker for acute rejection and steroid resistance in human renal transplantation. Human Immunol. 2001;62(1):21-31. https://doi.org/10.1016/s0198-8859(00)00228-7.
Tilly G, Doan-Ngoc T-M, Yap M, Caristan A, Jacquemont L, Danger R, Cadoux M, Bruneau S, Giral M, Guerif P, Nicol B, Garcia A, Laplaud DA, Brouard S, Pecqueur Hellman C, Degauque N. IL-15 Harnesses Pro-inflammatory Function of TEMRA CD8 in Kidney-Transplant Recipients. Front Immunol. 2017;8:778. https://doi.org/10.3389/fimmu.2017.00778.
Akoglu B, Lafferton B, Kalb S, Yosuf SE, Herrmann E, Zeuzem S, Goßmann J, Kachel HG, Scheuermann EH, Faust D. Rejection quantity in kidney transplant recipients is associated with increasing intracellular interleukin-2 in CD8+ T-cells. Transpl Immunol. 2014;31(1):17-21. https://doi.org/10.1016/j.trim.2014.05.004.
Cossarizza A, Chang HD, Radbruch A, Acs A, Adam A, Adam-Klages S, Agace WW, Aghaeepour N, Akdis M, Allez M, Nogueira Almeida L, Alvisi G, Anderson G, Andrä I, Annunziato F, Anselmo A, Bacher P, Baldari CT, Bari S, Barnaba V, Barros-Martins J, Battistini L, Bauer W, Baumgart S, Baumgarth N, et al. Guidelines for the use of flow cytometry and cell sorting in immunological studies (2nd edition). Eur J Immunol. 2019;49(10):1457-1973. https://doi.org/10.1002/eji.201970107.
Banff schema for grading liver allograft rejection: an international consensus document. Hepatology. 1997;25(3):658-663. https://doi.org/10.1002/hep.510250328.
Halamay KE, Kirkman RL, Sun L, Yamada A, Fragoso RC, Shimizu K, Mitchell RN, McKay DB. CD8 T cells are sufficient to mediate allorecognition and allograft rejection. Cell Immunol. 2002;216(1-2):6-14. https://doi.org/10.1016/s0008-8749(02)00530-0.
Gerlach UA, Vogt K, Schlickeiser S, Meisel C, Streitz M, Kunkel D, Appelt C, Ahrlich S, Lachmann N, Neuhaus P, Pascher A, Sawitzki B. Elevation of CD4+ Differentiated Memory T Cells Is Associated With Acute Cellular and Antibody-Mediated Rejection After Liver Transplantation. Transplantation. 2013;95(12):1512-1520. https://doi.org/10.1097/TP.0b013e318290de18.
Delfs MW, FurukawaY, Mitchell RN, Lichtman AH. CD8+ Tcell subsets TC1 and TC2 cause different histopathologic forms of murine cardiac allograft rejection. Transplantation. 2001;71(5):606-610. https://doi.org/10.1097/00007890-200103150-00005.
