МОРФОЛОГИЧЕСКИЙ МОНИТОРИНГ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ФИБРОЗА ПЕЧЕНИ У КРЫС
Аннотация
Введение. Тиоацетамид (ТАА) – индуцированный фиброз печени (ФП) признается классической моделью токсического поражения печени, однако для данной модели в литературе отсутствует описание последовательных стадий гистологических и ультраструктурных изменений разных клеточных популяций, принимающих участие в фиброзообразовании. Цель исследования. Провести морфологический мониторинг фиброзообразования в печени у крыс на ТАА-модели ФП по гистологическим и ультраструктурным изменениям гепатоцитов и перисинусоидальных липоцитов (HSC). Материал и методы. Эксперимент выполнен на 18 половозрелых крысах-самцах. Моделирование ФП проводилось путем внутрибрюшинного введения 2% раствора ТАА в дозе 10 мл/кг через день. Выполнялась световая микроскопия полутонких срезов печени, а также электронная микроскопия ультратонких срезов. Результаты. Исследование полутонких срезов ткани печени животных контрольной группы показало нормальную архитектуру паренхимы, большое количество HSC, содержащих крупные липидные капли («покоящийся» фенотип), очень малое количество цитоплазматического матрикса, бедного мембранными органеллами. У животных, получивших ТАА в течение 4 недель, зафиксирован мезенхимально-эпителиальный переход HSC из «покоящегося» типа в фиброгенное состояние (фиброгенный фенотип), что сопровождалось постепенным уменьшением числа ретинолсодержащих капель и появлением у HSC признаков фибробластоподобной клетки (ФК). У животных, получивших ТАА в течение 12 недель, в печени увеличивался пул фиброгенных клеток, происходил мезотелиально-мезенхимальный переход, при котором мезотелиальные клетки мигрируют вглубь паренхимы и приобретают мезенхимальный фенотип. Липидсодержащие активированные ФК обнаруживались и в фиброзной ткани вокруг центральной вены. Значительно чаще встречались очаги деструкции печёночной ткани, обусловленные некрозом и апоптозом гепатоцитов. Выводы. Введение ТАА индуцирует фиброзообразование в печени, а гистологический и ультраструктурный мониторинг состояния гепатоцитов и HSC позволяет мониторировать все стадии фиброзообразования, уточнить механизмы поражения внутриклеточных органелл и варианты гибели гепатоцитов. Данная модель ФП у крыс может быть применена при апробации новых антифиброзных лекарственных средств.
Литература
Delire B, Stärkel P, Leclercq I. Animal Models for Fibrotic Liver Diseases: What We Have, What We Need, and What Is under Development. J Clin Transl Hepatol. 2015;3(1):53-66. https://doi.org/10.14218/JCTH.2014.00035.
Starkel P, Leclercq IA. Animal models for the study of hepatic fibrosis. Best Pract Res Clin Gastroenterol. 2011;25(2):319-33. https://doi.org/10.1016/j.bpg.2011.02.004.
Hoffmann C, Djerir NEH, Danckaert A, Fernandes J, Roux P, Charrueau C, Lachagès AM, Charlotte F, Brocheriou I, Clément K, Aron-Wisnewsky J, Foufelle F, Ratziu V, Hainque B, Bonnefont-Rousselot D, Bigey P, Escriou V. Hepatic stellate cell hypertrophy is associated with metabolic liver fibrosis. Sci Rep. 2020;10(1):3850. https://doi.org/10.1038/s41598-020-60615-0.
Porter WR, Gudzinowicz MJ, Neal RA. Thioacetamideinduced hepatic necrosis. II. Pharmacokinetics of thioacetamide and thioacetamide-S-oxide in the rat. J Pharmacol Exp Ther. 1979;208(3):386-91.
Gilmore TD, Wolenski FS. NF-κB: where did it come from and why? Immunol Rev. 2012;246(1):14-35. https://doi.org/10.1111/j.1600-065X.2012.01096.x.
Akhtar T, Sheikh N. An overview of thioacetamide-induced hepatotoxicity. Toxin Reviews. 2013;32(3):43-46. https://doi.org/10.3109/15569543.2013.805144.
Tsyrkunov V, Andreev V, Kravchuk R, Kondratovich I. Ito stellate cells (hepatic stellate cells) in diagnosis of liver fibrosis. Gastroenterol Hepatol Open Access. 2019;10(4):213-219. https://doi.org/10.15406/ghoa.2019.10.00384.
Novogrodskaya Ya, Ostrovskaya O, Kravchuk R, Doroshenko Ye, Huliai I, Aleschyk A, Shelesnaya S, Kurbat M. Sposob modelirovanija jeksperimentalnogo tioacetamidnogo porazhenija pecheni u krys [The method of modelling of experimental thioacetamide liver damage in rats]. Gepatologija i gastrojenterologija [Hepatology and Gastroenterology]. 2020;4(1):90-95. https://doi.org/10.25298/2616-5546-2020-4-1-90-95. (Russian).
Sato T, Takagi I. An electron microscopic study of specimens fixed for longer periods in phosphate buffered formalin. J Electron Microsc. 1982;31(4):423-8.
Lee YH, Son JY, Kim KS, Park YJ, Kim HR, Park JH, Kim KB, Lee KY, Kang KW, Kim IS, Kacew S, Lee BM, Kim HS. Estrogen Deficiency Potentiates Thioacetamide-Induced Hepatic Fibrosis in Sprague-Dawley Rats. Int J Mol Sci. 2019;20(15):3709. https://doi.org/10.3390/ijms20153709.
Liedtke C, Luedde T, Sauerbruch T, Scholten D, Streetz K, Tacke F, Tolba R, Trautwein C, Trebicka J, Weiskirchen R. Experimental liver fibrosis research: update on animal models, legal issues and translational aspects. Fibrogenesis Tissue Repair. 2013;6(1):19. https://doi.org/10.1186/1755-1536-6-19.
An P, Wei LL, Zhao S, Sverdlov DY, Vaid KA, Miyamoto M, Kuramitsu K, Lai M, Popov YV. Hepatocyte mitochondria-derived danger signals directly activate hepatic stellate cells and drive progression of liver fibrosis. Nat Commun. 2020;11(1):2362. https://doi.org/10.1038/s41467-020-16092-0.
Tsyrkunov V, Chernyak S, Prokopchik N, Andreev V, Shulika V. Vlijanie bakterialnogo lipopolisaharida – pirogenala na regress fibroza v pecheni pri hronicheskom gepatite C [Impact of bacterial lipopolysaccharide – pyrogenal on a regression of liver fibrosis in chronic hepatitis C]. Recept [Recipe]. 2015;6:45-53. (Russian).
